Culture in vitro en milieu stéril

Découvert en L3, au cours des TP en biotechnologies (code : UE HLBI512).

         Dans un premier temps, j'ai utilisé des explants de carotte et de persil pour faire de la culture in vitro. Sous la hotte aspirante, j'ai mis en culture des explants de racine de carotte et des explants de tige de persil (voir ci-dessus image : schema_methode de sterilisation des explants). Ensuite, deux semaines plus tard, j'ai repiqué les explants de carotte dû à une contamination. Au bout de neuf semaines, les cals étaient plus importants, mais il n'y avait pas de différenciation cellulaire.
         Dans un second temps, il y a eu une mise en culture d'explants de tabac (feuille) dans des milieux contenant diverses quantités de cytokines et d'auxines.
         Cependant, la fragilité des explants est importante. En effet, s'il y a des problèmes de stérilisations, la culture in vitro est impossible (voir images ci-dessus : contaminations). De plus, des repiquages sont nécessaires pour maintenir une pression du milieu, sinon, il y a différenciation non spécifique des explants. Sans repiquage, la croissance des explants fait baisser la concentration en phytohormones et la gélose explose (voir image ci-dessus : Gelose). Il y a une baisse d'approvisionnement en nutriments.

         Voici, ci-dessous, le premier article scientifique, sur ce sujet, écrit avec ma binôme.